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艾科试剂:黄忠等构建手足口病相关病毒的感染性克隆


 
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By : 艾科试剂   |  2014-06-06

中国科学院上海巴斯德研究所关于构建手足口病相关的柯萨奇病毒A16型(coxsackievirus A16,CVA16)感染性克隆的最新研究成果。

手足口病是5岁以下儿童中发生的常见传染病,仅2010年和2011年,全国共有3,394,375例感染,其中死亡1414例,对于儿童的健康成长造成严重威胁,但目前尚无针对手足口病的预防性疫苗或治疗性药物。

CVA16和人肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)是引起手足口病的主要病原体,因此,了解CVA16和EV71基因组中各个区域的功能,对加强CVA16和EV71的病毒学和免疫学研究,尽快研制出有效的预防和治疗方法,保障中国儿童的生命健康有非常重要的意义。然而,EV71和CVA16均属于RNA病毒,直接对它们的基因组进行遗传操作非常困难。

上海巴斯德所研究生刘菲、刘庆伟、蔡一村等在黄忠研究员指导下,通过分子生物学手段,提取了CVA16病毒的基因组RNA,并且进行体外反转录操作获得与病毒基因组相对应的cDNA序列,将此序列构建到一个表达载体中,获得携带感染性cDNA克隆的质粒。利用该质粒可以包装出具有感染性的拯救病毒。通过观察细胞病变、蛋白质印迹以及免疫荧光等方法证实,拯救病毒与野生病毒的功能完全一致。同时,测序结果还表明,拯救病毒的基因组具有稳定的遗传性。

利用新构建出的感染性克隆,科研人员可以很方便地对RNA病毒的基因组进行体外操作,从而对病毒的结构、功能等多方面进行研究。更长远地来说,CVA16感染性克隆为今后阐明病毒的致病性,开发针对EV71/CVA16的预防性疫苗和治疗性药物等提供了研究基础。

该研究得到中国科学院“百人计划”、生化工程国家重点实验室开放基金及赛诺菲-安万特-中科院上海生命科学研究院优秀青年人才基金的资助

 
 
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