胰月示-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂基础(TSC)
Tryptose Sulfite Cyc
CAS号: | |
分子式: | |
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别名: | 胰-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂基础 (TSC) |
分子结构式: |
货号 | 品名 | 产品规格 | 包装 | 单价(RMB) | 可用库存 | 备注 | 数量 | |
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性状
质量标准
用途
危险性质
贮存
原 理:胰月 示 、大豆蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源;偏亚硫酸氢钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;卵黄含有卵磷脂,可检测某些含卵磷脂酶的梭菌;琼脂是培养基的凝固剂;D-环丝氨酸抑制非梭菌的细菌。
配方(每升)偏亚硫酸氢钠 1g
柠檬酸铁铵 1g
琼脂15g
胰月 示15g
大豆胨 5g
酵母膏粉 5g
最终pH 7.6±0.2
用于食品和临床样本中产气荚膜梭菌的分离培养和计数(SN0177-92)。
使用方法:
1. 称取本品42g,加入蒸馏水或去离子水1000 mL ,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,每 瓶250 mL ,121℃高压灭菌15 mL。
2. 待TSC培养基冷至50℃左右,每250 mL培养基加过滤除菌的0.5%D-环丝氨酸溶液20.0 mL,(制作卵黄平板:加50%卵黄乳液20 mL到250 mL含D-环丝氨酸培养基中),立即摇匀。
3. 倾注TSC琼脂到10个灭菌平皿中,每皿约5 mL,并迅速旋转平皿,使琼脂铺平。当琼脂凝固后,将每个平皿编号标记,以无菌操作,吸取稀释样品1 mL分别加到每个琼脂平板表面中心。再向平皿中倾注TSC琼脂15 mL,缓慢地旋转平皿,使其与接种物混合均匀。也可用L型玻璃棒,将0.1 mL样品稀释液均匀地涂布于含卵黄乳液的TSC琼脂上,将平板水平静置5-10 min使接种物被吸收。然后用不含卵黄的TSC琼脂10mL覆盖平板表层(含卵黄的TSC琼脂最适于同时含有其他还原亚硫酸盐梭状芽孢杆菌的食品)。
4. 琼脂凝固后,将平板正置于厌氧罐内,于36±1℃培养。不含卵黄的TSC琼脂平板培养20h,含卵黄的TSC琼脂平板培养24h。
5. 取出平板用肉眼观察生长情况和观察有无黑色菌落。挑选生长有20-200个黑色菌落的平板,用菌落计数器将黑色菌落计数并半算每 克食品中产气荚膜梭状芽孢杆菌数。产气荚膜梭菌的菌落在含 卵黄的培养基上呈黑色。并通常有2-4mm宽的白色沉淀环(卵磷脂酶作用的结果)。但有少数菌株的卵磷脂酶反应较弱,或呈阴性。应对所有怀疑为产气荚膜梭 菌的黑色菌落进行计数,并做进一步的证实试验。
附:(1)D-环丝氨酸溶液:
溶解1gD-环丝氨酸于200mL磷酸盐缓冲液(c=0.05mol/L)(pH8.0±0.1)中(不加热),经0.45µm滤膜除菌。
(2)卵黄乳液:
用硬刷刷洗鲜蛋,沥干,放70%乙醇中浸泡1h。以无菌操作取出蛋黄,加等体积无菌0.85%氯化钠溶液,混合置4℃贮存。
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